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Analyse de la production d’AAV à l’aide de l’interférométrie de biocouche

Détermination du titre de la capside totale de l’AAV et du rapport vide/plein grâce à la technologie d’interférométrie par couche biologique (BLI) de Gator Bio

Découvrez la technique flexible de détermination du titre d’AAV et du rapport vides/pleines dans des échantillons purifiés ou des extraits bruts.

L’interférométrie de bio-couche (BLI) est une méthode établie employée conventionnellement dans la recherche sur les interactions biomoléculaires. Cette technique sans marquage mesure la liaison des biomolécules à la surface d’un biocapteur en temps réel afin de déterminer les taux cinétiques des paires d’interactions ou de quantifier des échantillons biomoléculaires. La toute dernière génération de biocapteurs AAV de Gator Bio ouvre cette application au domaine des vecteurs viraux et permet une quantification précise et fiable du titre de capsides total de l’AAV. Avec les biocapteurs AAVX et AAV9 ainsi que le nouveau High-Sensitivity Kit, Gator peut être utilisé pour l’étude des sérotypes 1 – 10 de l’AAV dans une plage dynamique allant de 5E+6 à 1E+13 vp/ml.

Le nouveau kit vides/pleines est une solution pratique et peu coûteuse permettant de réaliser une étape complexe de la recherche sur l’AAV. Avec ce nouvel outil, le rapport vides/pleines dans des échantillons d’AAV peut être déterminé après purification ou sur des extraits bruts avec une plage dynamique de 5 % – 100 % Full et une résolution de 10 %. Avec un rendement de 8 échantillons en 40 minutes et un volume d’échantillon minimum de 40 µl seulement, ce kit vient parfaitement compléter le processus upstream. La gamme AAV de Gator Bio offre une méthode flexible aux multiples possibilités d’application dans la recherche et le développement sur les vecteurs viraux, qui se démarquent par une haute précision, des temps de cycle plus courts et une grande plage dynamique.

Découvrez notre gamme de solutions rapides et faciles pour l’analyse des AAV !

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AAV Analytics Solutions

Calculated vp/ml

Haute précision

Gator Bio détecte la liaison des biomolécules à la surface du capteur, directement et en temps réel, sans nécessiter des marqueurs supplémentaires, des anticorps ou d’autres méthodes de détection indirecte. La précision des systèmes de Gator Bio est supérieure à celle des kits ELISA conventionnels grâce à la nouvelle génération de biocapteurs AAV déjà revêtus et grâce à la haute sensibilité de la technologie BLI.

Gator-AAV-Grafik2

Temps de test courts

Jusqu’à 8 échantillons peuvent être mesurés en parallèle en 2 minutes. Le système de Gator Bio peut quantifier 96 échantillons en moins de 30 minutes avec de surcroît un temps de préparation minime. L’analyse des données dans le logiciel intégré est facile et permet de procéder à l’évaluation des résultats immédiatement après l’expérience.

Conc. of AAV (vg/mL)

Grande plage dynamique

Il est inutile de diluer les échantillons avant la quantification, que ce soit à la phase initiale de croissance, pendant la purification ou la phase de CQ. Cela réduit la durée totale du processus et élimine le risque d’erreur pendant la dilution des échantillons.

AAV Ratio Kit Workflow

Détermination du rapport vides/pleines

L’approche comprend trois étapes :

  1. Liaison de l’AAV sur des capteurs AAVX ou AAV9
  2. Transfert et lyse de particules d’AAV pour la libération d’ADNsb
  3. Quantification de l’ADNsb libéré avec des capteurs d’ADNsb
Gator-AAV-Grafik5

Mesure de l’ADNsb

L’illustration montre le signal de liaison de l’ADNsb pour des capsides d’AAV2 lysées de même concentration. Les signaux de l’ADNsb sont proportionnels aux particules pleines correspondantes dans l’échantillon.

Constatez par vous-même les avantages des nouvelles solutions d’AAV de Gator Bio dans une démonstration !

Autres caractéristiques

  • Robuste : La quantification et la détermination du rapport vides/pleines sont possibles dans des extraits bruts, en milieu cellulaire ou après purification.
  • Moins de maintenance : Les capteurs et les plaques d’échantillons sont jetables. Aucun protocole complexe de nettoyage ni aucune maintenance sur les appareils n’est donc nécessaire.
  • Faibles coûts : Les capteurs AAVX et AAV9 peuvent être régénérés automatiquement afin de réduire les coûts par test.
  • Faible volume d’échantillon : La quantification est possible avec un volume d’échantillon minimum de seulement 40 µl.
  • Faible consommation d’échantillon : La mesure est non invasive. Le précieux échantillon peut donc être récupéré à la fin de la quantification.
  • Simplicité d’utilisation : Le logiciel intuitif permet de configurer et d’analyser rapidement et facilement le test.

Retrouvez de plus amples informations dans la Note d’application : Comparaison entre Gator® BLI et Progen ELISA pour la quantification des sérotypes de l’AAV

Application note - Gator Bio AAV Quantitation

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